Лаборатория биохимической токсикологии и фармакологии

Лаборатория выполняет экспериментальные исследования влияния острых и хронических интоксикаций на биохимические показатели гомеостаза, а также влияние фармакологической коррекции на выявленные патологические состояния.

Основные компетенции

• оценка субхронической (хронической) токсичности химических веществ;
• экспериментальные исследования биохимических маркеров гепато-, нефро-, кардио-, иммуно-, гематотоксичности и оценка эффективности средств фармакологической коррекции выявленных нарушений;
• исследования влияния экстремальных условий, в том числе десинхроноза, физических нагрузок, на показатели гомеостаза для оценки адаптивных возможностей организма и оценка эффективности средств фармакологической коррекции таких состояний;
• проведение доклинических исследований нейротоксичности лекарственных средств;
• оценка иммунотоксических и аллергизирующих свойств лекарственных препаратов при проведении доклинических исследований;
• оценка генотоксичных свойств лекарственных препаратов в тесте Эймса при проведении доклинических исследований.
• генетические исследования для обнаружения единичных однонуклеотидных замен, оценки метилирования ДНК и др.

Проводимые исследования

• концентрации субстратов и активности ферментов в биологическом материале;
• гормонального профиля методами иммуноферментного и иммунохемилюминесцентного анализа;
• параметров ферментативного и неферментативного звеньев антиоксидантной системы;
• изменения гематологического профиля при применении лекарственных средств;
• показатели неспецифического, специфического гуморального и клеточного иммунитета;
• аллергические реакции (анафилактического шока, непрямой реакции дегрануляции тучных клеток, реакции иммунных комплексов и конъюнктивальной пробы);
• оценка генотоксичности в тесте Эймса;
• маркеров нейротоксичности и нейропротекции;
• маркеров апоптоза методом иммуноферментного анализа;
• постановка 1D-электрофореза в ПААГ;
• секвенирование белков и пептидов;
• генетические полиморфизмы методом пиросеквенирования;
• экспрессия генов методом количественной ПЦР.

Основное оборудование


Комплекс для оценки параметров гомеостаза:

1. Гематологрический анализатор «Advia 2120»
2. Биохимический анализатор А-25
3. Анализатор мочи «Combilyzer»
4. Анализатор осадка мочи «UriSed»
5. Анализатор коагулограммы «BFT II»
6. Иммуно-ферментный анализатор ImunoСhem2100
7. Анализатор метаболизма SeaHorse

Комплекс для оценки нейротоксичности ксенобиотиков:

1. Спектрофотометры DU-800, UV-1800
2. Иммуно-хемилюминесцентный анализатор Immulite 2000
3. Иммуно-ферментный анализатор ImunoСhem2100
4. Биохимический анализатор А-25
5. Система «Видеотест» для иммуногистохимических исследований
6. Система для проведения количественной ПЦР с детекцией в реальном времени - «CFX96™ Real-Time PCR Detection»

Комплекс для иммунологических исследований:

1. Ламинарно-потоковый шкаф KH-85B
2. Планшетный спектрофотометр Synergy2
3. СО2 - инкубатор
4. Термостат GL2 – 2
5. Автоматический промыватель планшет ELx 50
6. Настольная центрифуга с охлаждением Z300К
7. Настольная центрифуга ELMI СМ-6М
8. Микроскоп Optika

Комплекс для генетических исследований:

1. Система для проведения количественной ПЦР с детекцией в реальном времени - «CFX96™ Real-Time PCR Detection»
2. Пиросеквенатор PyroMark Q24
3. ПЦР-бокс
4. Ламинарно-потоковый шкаф KH-85B

Метод оценки генотоксичности - Тест Эймса

Тест Эймса (Ames test) — генетический тест с использованием бактерий Salmonella typhimurium в качестве тест объекта. Предназначен для оценки мутагенного потенциала химических соединений. Мутационный тест на Salmonella typhimurium является бактериальной тест-системой для учета мутаций к прототрофности по гистидину при действии химических соединений и/или их метаболитов, индуцирующих мутации типа замены оснований или сдвига рамки считывания в геноме этого организма.

Если тестируемое соединение и/или его метаболиты обладают мутагенной активностью, то они будут индуцировать обратные мутации от ауксо-трофности к прототрофности по гистидину у гисти-динзависимых штаммов Salmonella typhimurium

Широкое применение этого метода связано с высокой корреляцией между канцерогенной и мутагенной активностями химических веществ Положительный результат в тесте показывает, что химическое вещество может обладать канцерогенными свойствами.

Имеется большое количество модификаций теста Эймса. Наиболее важной является использование микросомных фракций печени грызунов для активации промутагенов. Микросомные фракции печени содержат все основные ферменты метаболической активации ксенобиотиков , поэтому, если испытуемое вещество обладает промутагенной активностью, оно активируется ферментами микросом in vitro, и такой результат легко выявляется в тесте Эймса.